博发彩票APP下载

整天做RACE,PCR就是不出东西,整天重复,这算工作量吗? 

2016-08-17新闻资讯

本人从事分子实验,(PCR),主要是克隆一种植物中的一个酶的未知基因,先前从未有人研究过这种植物中的这个基因。之前做PCR,出来一段基因序列,经过序列相似度比对,确定是这个基因中的一段。然后,做RACE,但做了很长时间都没有东西出来,后面还要构建表达载体,做原核表达-------   哎!这不快毕业了吗!急呀!!!!!   后来跟导师交流,导师说做不出来没关系,只要工作量够了就可以毕业。  我就在想了,这个做分子的工作量怎么算呀?  整天做RACE,PCR就是不出东西,整天重复,这算工作量吗?  如果不算的话,那做分子的什么才算工作量?  我应该怎么攒这个工作量? 


做分子的结果容易出,但也不容易出。。。。。做分子主要是实验周期不是特别长,所以工作量的话,就听你们导师的吧,你导师不着急,你就不用着急。或者跟导师交流一下。。。。本科毕业很水的。。。。。。
我是研究僧!!!!
 

博发彩票APP下载这种新基因的克隆有时候就是这样的,为了保证能克隆出来,最好手头同时做几个基因的克隆。

 

以前我也出现过这种拿不到全基因的情况。当时我在NCBI里面找了好几个和我这个菌亲缘性很近的全集因组测通的种,然后对比这个基因及其上下游基因的同源性。一般如果亲缘性很近,那么他们基因同源性和基因排布方式都差不多,我用已有的片段设计引物,和上下游基因内部保守序列的引物对扩,拿到了目标基因上下游序列,也没有做RACE。植物应该内含子比较多,但是也可以一试。仅供参考。

 


博发彩票APP下载 我还在想呢,一般的本科生论文谁着急啊。不过硕士的话,楼主建议你好好跟导师沟通沟通哦,别到时候延期就老火老

我可不想延期呀!!!

以前我也出现过这种拿不到全基因的情况。当时我在NCBI里面找了好几个和我这个菌亲缘性很近的全集因组测通的种,然后对比这个基因及其上下游基因的同源性。一般如果亲缘性很近,那么他们基因同源性和基因排布方式都 ...
我跟老师交流过了,老实说不出来没关系,只要工作量够了就可以毕业。眼看就要毕业了,这做分子整天重复PCR,工作量怎么证明?难道答辩的时候把实验过程中不成功的电泳图都贴上去,把测序后不对的测序单子和结果给答辩老师看吗?  简直愁死了!  怎么办呀?   就想问一问这工作量是怎么一回事?

可能引物设计存在问题,我以前做过从一株粘红酵母里面拉出一段未知的羰基还原酶基因,引物的设计十分关键。可以尝试利用已知片段作为引物通过walking拿到更多的片段,最好做ORF分析,祝楼主顺利毕业!
 

我看我们实验室有个人做RACE据说只要有结果 只要你会YY就能分析很多的
你可以把拿到的序列从生信方面分析下 就是所谓的预测 看看啊好写


我看我们实验室有个人做RACE据说只要有结果 只要你会YY就能分析很多的
你可以把拿到的序列从生信方面分析下 就是所谓的预测 看看啊好写
关键是RACE没结果,只是出来一个小片段,全长还木有出来。YY是什么意思?  求指教!
 

RACE不出来的问题,不知道这个基因有没有表达特异性啊,比如只在某个组织中表达,在其他组织里就是扩不出来。

哦,这个也有可能! 
 

工作量肯定是不好攒的,也不是做多态,微卫星什么的,所以说认真做实验才是王道。所以建议一下:
既然可以比较序列相似度,所以你就在其他物种中有这个相似的序列,那么就找那个相似度最大的来设计引物,多设计几条,然后来拉全长。
此外,因为有了部分序列,可以设计荧光定量引物,对其在不同组织,器官,部位,以及不同生长时期的表达量进行荧光定量,然后研究是表达趋势或者规律。这样做下来,那个工作量也蛮多的了。

工作量肯定是不好攒的,也不是做多态,微卫星什么的,所以说认真做实验才是王道。所以建议一下:
既然可以比较序列相似度,所以你就在其他物种中有这个相似的序列,那么就找那个相似度最大的来设计引物,多设计几 ...

谢谢哥哥帮忙!!我会努力的!谢谢!
 

我也是一直RACE,就是不出来,急惨了都


我看我们实验室有个人做RACE据说只要有结果 只要你会YY就能分析很多的
你可以把拿到的序列从生信方面分析下 就是所谓的预测 看看啊好写
额。。。。。。YY这里就是自己找理论依据支持你的结论并预测
RACE有那么难P吗
或者你查查有没有人之前做过这个 先把别人做的建个库 然后跟你自己的结果对比 虽然一条少了点 总比没有结果好吧
 
恒发彩票 吉利彩票计划 迪士尼彩乐园开户 利来彩票注册 帝皇彩票平台 状元彩票平台 吉林快3 pk10怎么玩 帝皇彩票 吉利彩票开户