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提取的蛋白溶液浓度太低,如何浓缩?

2016-10-17技术资料

我提取的蛋白溶液浓度太低,想浓缩一下。请问各位有没有什么简单的方法。
我看到有人说可以选用孔径较小的凝胶,如SephadexG25或G50,将凝胶直接加入蛋白溶液中。根据干胶的吸水量和蛋白液需浓缩的倍数而称取所需的干胶量。放入冰箱内,凝胶粒子吸水后,通过离心除去。
这样可以吗?对蛋白会有什么影响吗?

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我觉得最为便捷的是超滤管浓缩。
 
加压超滤浓缩,最方便,几十分钟搞定
 
我没听说过楼主所说的做法,我很想知道是谁告诉你的,他这么做过没有。
 
提取的蛋白溶液浓度太低,如何浓缩?
 
是从网上搜到的

我觉得最为便捷的是超滤管浓缩。
还得再买超滤离心管 , 是不是很贵啊?
 
我以前用的两种方法,你看实验室条件可以选用,一、4度条件下PEG4000干粉包埋透析袋,不断把需浓缩的蛋白质溶液加入到透析袋里,直到剩下很小的体积(如1ml);二、真空冻干。
 

还得再买超滤离心管 , 是不是很贵啊?
不贵,几十块钱一个,一个管浓缩一个蛋白,不要混用,可以重复利用。
 
人家不零卖啊。我看都是一包十几个呢, 我是没必要买那么多 
 
多跟销售磨磨,或者可以买其他的时候让送上两个。
 
其实买个透析袋就可以了,很便宜的啊,很简单拿的过程。
 

沉淀;
超滤;
透析袋隔膜吸水;
冻干;
。。。。。。


我以前用的两种方法,你看实验室条件可以选用,一、4度条件下PEG4000干粉包埋透析袋,不断把需浓缩的蛋白质溶液加入到透析袋里,直到剩下很小的体积(如1ml);二、真空冻干。
恩 这两个方法我知道,就是我实验室有葡聚糖凝胶,看网上蛋白浓缩方法中有我说的那种方法,看来大家都没用过,那我就试试其他方法吧
 
抽真空浓缩干燥
用透析袋的话,除了用PEG4000干粉包埋透析袋还能用啥啊?我实验室有8000-14000的透析袋,我的蛋白大小为40KD
冼亮淀粉酶

你是不是从这个网页上看到的?有没有想过溶胀后的凝胶怎么处理?如果丢掉有点可惜,如果保存着,不知道以后还能不能有人用。

 
是这个http://q.sohu.com/forum/10/topic/5723195,写得非常简单。就是不知道有没有人用过。我想凝胶烘干之后是不是还能再用
冼亮淀粉酶

这我就不知道了,但是凝胶离心和让它自然沉降,最终体积是一样的,不会离心之后就体积更小啊,但是离心能让它更快沉降。你的那个网页上说的4.7.9.10.11我做过,其它的没有做过。


用透析袋的话,除了用PEG4000干粉包埋透析袋还能用啥啊?我实验室有8000-14000的透析袋,我的蛋白大小为40KD
我看到的资料里都是用的PEG,大于4000的也可以。你所说的透析袋对你的蛋白没有问题。透析袋用之前注意要处理。该步骤没有什么困难,就是注意温度,浓缩的速度也可以接受。祝你好运
 
前处理就是用沸水煮10min吧,浓缩过程中对温度有要求吗?
 
景通生物显微镜: 

前处理就是用沸水煮10min吧,浓缩过程中对温度有要求吗?
http://zhidao.baidu.com/question/6193051.html透析袋处理
透析过程中的温度4度就可以
 

楼主蛋白体积小的话用根管子浓缩就好了,体积大的话得用膜包才行啊!

用关注子什么意思啊?不是需要吧蛋白溶液装到透析袋里,外面放PEG吗?
 

可以使用上海生工代理的以下产品
Column-PROTEIN-Concentrate™------Suitable for Larger Volumes of Dilute Protein Solution.柱式微量蛋白浓缩试剂盒   786-126
OrgoSol-PROTEIN-Concentrate™
活性保持型蛋白沉淀式浓缩试剂盒   786-125

可以将其放入透析袋中,然后用聚乙二醇(强烈的吸水性)包埋浓缩。
 
我的透析袋是8000-10000的,用PEG6000包埋可以吗?有人说PEG6000会进到透析袋内。我前几天浓缩过程中,透析袋好像破了,PEG溶解后可能进到透析袋里,蛋白沉淀了,但不是那种絮状的沉淀,是很细的那种,聚到试管底了。这种现象蛋白变性了吗?
 
透析袋在缓冲溶液中透析后很容易破裂,我前一阵子也经历过,我想不一定是PEG浓缩过程导致的。至于PEG能否透进袋内这个问题不是很清楚,请见谅!
 
把你的蛋白装入一定的透析袋,用PEG20000浓缩。效果明显比较好

我看到的资料里都是用的PEG,大于4000的也可以。你所说的透析袋对你的蛋白没有问题。透析袋用之前注意要处理。该步骤没有什么困难,就是注意温度,浓缩的速度也可以接受。祝你好运
不明白~如果透析袋是8000-14000,不是意味着小于8000的都会通过透析袋吗,那么PEG怎么不会进到透析袋里面呢
 
浓缩一定要保证不要改变蛋白的性质
 
我的目标是8000多,用这个透析袋没有问题。至于为什么,我也不知道。我觉得透析袋不能那么严格的看。那可能只是一个大概。
还是多动手,别光想,实验和想象有时候差距较大。

浓缩一定要保证不要改变蛋白的性质
当然不想让蛋白性质改变啦,怎样才能保证不变性呢
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